白細胞介素1β(IL-1β)elisa試劑盒基本信息簡介
IL-1簡介
又稱為淋巴細胞刺激因子。
細胞來源
主要由活化的單核-巨噬細胞產生。
存在形式
IL-1α和IL-1β。
主要生物學功能
(1)局部低濃度--免疫調節:協同刺激APC和T細胞活化,促進B細胞增殖和分泌抗體。
(2)大量產生--內分泌效應:誘導肝臟急性期蛋白合成;引起發熱和惡病質。
IL-1的一般性質
1.IL-1的產生細胞IL-1主要由巨噬細胞產生;此外幾乎所有的有核細胞,如B細胞、NK細胞、體外培養的T細胞、角質細胞、樹突狀細胞、星形細胞、成纖維細胞、中性粒細胞、內皮細胞以及平滑肌細胞均可產生IL-1。正常情況下只有皮膚、汗液和尿液中含有一定量的IL-1,絕大多數細胞在受到外來抗原或絲裂原刺激后才能合成和分泌IL-1。
2.IL-1分子IL-1有兩種不同的分子形式,一種稱IL-1α,由159個氨基酸組成;另一種稱為IL-1β,含153個氨基酸;兩者由不同的基因分別編碼。雖其氨基酸順序僅有26%的同源性,然而IL-1α和IL-1β以同樣的親和力結合于相同的細胞表面受體,發揮相同的生物學作用。
3.IL-1受體(IL-1R)IL-1R幾乎存在于所有有核細胞表面,每個細胞的IL-1R數目不等,少則幾十個(如T細胞),多則數千個(如成纖維細胞)。IL-1R主要有兩種類型:一種為IL-1R1,其分子伸入胞漿內的肽鏈部分較長,起著傳遞活化信號的作用;另一種為IL-1R2,胞內部分的肽段較短,不能有效地傳遞信號,而是將胞外部分的肽鏈釋放到細胞外液中,以游離形式與IL-1結合,發揮反饋抑制作用。GM-CSF、G-CSF及IL-1自身均可提高細胞IL-1R的表達水平,而TGF及皮質類固醇能降低IL-1R的表達。
白細胞介素1β(IL-1β)elisa試劑盒操作方法
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
我司elisa試劑盒的優點:操作簡單、快速、靈敏度高、特異性強、性價比高、樣品所需量少
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